利用Solentim STUDIUS細(xi)胞成像(xiang)分析(xi)儀評估(gu)細(xi)胞IgG產率的操(cao)作方法(fa)

  摘(zhai)要(yao)：本(ben)實(shi)驗方(fang)法(fa)旨(zhi)在(zai)介紹如(ru)何(he)使用Solentim STUDIUS細(xi)胞成像(xiang)分析(xi)儀進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG 產率評估(gu)。本(ben)方(fang)法(fa)詳細(xi)描述(shu)了(le)從鋪板到生(sheng)長過程(cheng)中的(de)產(chan)率分析(xi)、排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)的(de)全(quan)過程(cheng)，以(yi)及(ji)STUDIUS在(zai)細(xi)胞系(xi)開(kai)發中的(de)應(ying)用價值(zhi)。

關(guan)鍵(jian)詞(ci)：Solentim STUDIUS，細(xi)胞成像(xiang)分析(xi)儀，細(xi)胞IgG產率，實(shi)驗方(fang)法(fa)

在(zai)生(sheng)物(wu)制藥領(ling)域(yu)，細(xi)胞培養(yang)技術已成為生(sheng)產重組(zu)蛋(dan)白類藥(yao)物(wu)的關(guan)鍵(jian)步驟。其(qi)中，細(xi)胞IgG產率的評估(gu)對於(yu)優(you)化生(sheng)產過程(cheng)和(he)提(ti)高(gao)產量(liang)具(ju)有重(zhong)要(yao)意義(yi)。Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀作為壹種(zhong)數(shu)字(zi)化時(shi)代(dai)的(de)實(shi)驗室(shi)儀(yi)器(qi)，它(ta)具(ju)備(bei)樣(yang)本(ben)追(zhui)蹤(zong)、自(zi)動分類、即時分類、避(bi)免人(ren)為錯誤和(he)自(zi)動創(chuang)建(jian)單克隆性報告(gao)等功(gong)能(neng)，為細(xi)胞IgG產率評估(gu)提(ti)供了(le)高(gao)效、準(zhun)確(que)的(de)解(jie)決(jue)方(fang)案(an)。

使(shi)用Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG產率評估(gu)的詳(xiang)細(xi)實(shi)驗方(fang)法(fa)步驟如(ru)下：

壹、實(shi)驗準(zhun)備(bei)

1. 實(shi)驗材(cai)料(liao)：細(xi)胞培養(yang)板、細(xi)胞懸(xuan)液、IgG檢測試(shi)劑盒。

2. 實(shi)驗儀(yi)器(qi)：Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀、細(xi)胞培養(yang)箱、離心(xin)機、酶標(biao)儀。

3. 細(xi)胞培養(yang)板的準(zhun)備(bei)：選(xuan)擇(ze)適(shi)合(he)細(xi)胞生(sheng)長的細(xi)胞培養(yang)板，並(bing)根(gen)據實(shi)驗需求進行(xing)滅菌(jun)處理。

4. 細(xi)胞懸(xuan)液的準(zhun)備(bei)：從細(xi)胞庫(ku)中取出(chu)目(mu)標(biao)細(xi)胞株，進(jin)行(xing)復蘇和(he)擴(kuo)增，調(tiao)整細(xi)胞密度至(zhi)所(suo)需的接(jie)種(zhong)密度。

3. IgG檢測試(shi)劑盒的(de)準(zhun)備(bei)：根(gen)據試劑盒說(shuo)明書，準(zhun)備(bei)所(suo)需的試劑和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)。

4. Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀的(de)準(zhun)備(bei)：開(kai)啟(qi)儀(yi)器(qi)，進(jin)行(xing)系(xi)統(tong)自(zi)檢和(he)校(xiao)準(zhun)。

二(er)、細(xi)胞鋪板(ban)

1. 將準(zhun)備(bei)好(hao)的(de)細(xi)胞懸(xuan)液按照(zhao)預定(ding)的(de)接(jie)種(zhong)密度鋪板(ban)到細(xi)胞培養(yang)板中，每孔(kong)加(jia)入(ru)適(shi)量的(de)細(xi)胞懸(xuan)液。

2. 輕輕搖動培(pei)養(yang)板，使細(xi)胞均勻(yun)分布(bu)。為保證細(xi)胞鋪板(ban)均勻(yun)，可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)Solentim VIPS進行(xing)全(quan)自(zi)動鋪(pu)板(ban)驗證。

3. 將細(xi)胞培養(yang)板放入(ru)細(xi)胞培養(yang)箱中，根(gen)據細(xi)胞生(sheng)長需求設定(ding)適(shi)宜的(de)培(pei)養(yang)條件（如溫(wen)度、濕度、CO2濃度等）。

三、細(xi)胞培養(yang)與成(cheng)像(xiang)分析(xi)

1. 在(zai)細(xi)胞培養(yang)過程中，根(gen)據實(shi)驗設計(ji)的(de)時間(jian)點，使(shi)用(yong)Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀對細(xi)胞進行(xing)成像(xiang)分析(xi)。

2. 在(zai)成(cheng)像(xiang)分析(xi)前(qian)，根(gen)據儀器(qi)操(cao)作手冊(ce)進(jin)行(xing)參數(shu)設置，包(bao)括成(cheng)像(xiang)區(qu)域(yu)、曝(pu)光時(shi)間、分辨(bian)率等。

3. 將細(xi)胞培養(yang)板放入(ru)STUDIUS儀器(qi)中，啟(qi)動成(cheng)像(xiang)分析(xi)程序(xu)。

4. 儀(yi)器(qi)將自(zi)動對每個孔進(jin)行(xing)成像(xiang)，並(bing)記錄細(xi)胞的形(xing)態(tai)、生(sheng)長狀態(tai)等數(shu)據。

5. 成像(xiang)分析(xi)完成(cheng)後(hou)，儀(yi)器(qi)將生(sheng)成彩(cai)色(se)節點，代(dai)表(biao)細(xi)胞生(sheng)長過程(cheng)中的(de)關(guan)鍵(jian)時間(jian)點，實(shi)現數據跟蹤(zong)和(he)審(shen)計追蹤。

四(si)、IgG產量檢測

1. 根(gen)據IgG檢測試(shi)劑盒說(shuo)明書，收(shou)集(ji)細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing)液。

2. 將上(shang)清(qing)液進行(xing)適(shi)當稀釋，以(yi)便於酶標(biao)儀檢測。

3. 使(shi)用酶標(biao)儀，根(gen)據試劑盒提(ti)供的(de)檢測方(fang)法(fa)，對上(shang)清(qing)液中的(de)IgG含(han)量(liang)進行(xing)定(ding)量(liang)檢測。

4. 記錄檢測結果，包(bao)括吸(xi)光度值(zhi)、IgG濃度等。

五(wu)、數(shu)據處理與分析(xi)

1. 將STUDIUS成像(xiang)分析(xi)結果與IgG產(chan)量(liang)檢測結果進行(xing)關聯(lian)，建(jian)立(li)細(xi)胞形(xing)態(tai)、生(sheng)長狀態(tai)與IgG產(chan)率之間(jian)的(de)關系(xi)。

2. 利用STUDIUS的數據分析(xi)功(gong)能(neng)，對細(xi)胞克隆進行(xing)排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)，篩選(xuan)出(chu)高(gao)IgG產率的細(xi)胞克隆。

3. 分析(xi)數據，生(sheng)成報告(gao)，為後(hou)續(xu)實(shi)驗和(he)生(sheng)產過程(cheng)提(ti)供參(can)考。

六、實(shi)驗結束

1. 關閉(bi)Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀，進(jin)行(xing)日常(chang)維護和(he)清(qing)潔。

2. 處理實(shi)驗產(chan)生(sheng)的廢物(wu)，如廢(fei)棄的細(xi)胞培養(yang)板、試劑等。

3. 記錄實(shi)驗過(guo)程(cheng)中的(de)關(guan)鍵(jian)參數(shu)和(he)結果，整理實(shi)驗數(shu)據。

通過(guo)以(yi)上(shang)詳(xiang)細(xi)實(shi)驗方(fang)法(fa)步驟，使(shi)用(yong)Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG產率評估(gu)，可以(yi)實(shi)現從鋪板到生(sheng)長過程(cheng)中的(de)產(chan)率分析(xi)、排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)的(de)全(quan)過程(cheng)，提(ti)高(gao)實(shi)驗的(de)準(zhun)確(que)性和(he)效率。

七、實(shi)驗結果與分析(xi)

1. 產率分析(xi)結果：STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀可(ke)實(shi)時(shi)追(zhui)蹤(zong)細(xi)胞生(sheng)長過程(cheng)，通過(guo)彩(cai)色(se)節點記錄關(guan)鍵(jian)時間(jian)點的(de)數(shu)據。通過(guo)對細(xi)胞形(xing)態(tai)、生(sheng)長速度等參(can)數的(de)分析(xi)，可初(chu)步評估(gu)細(xi)胞IgG產率。

2. IgG產量(liang)檢測結果：酶標(biao)儀檢測結果顯示(shi)，不同(tong)細(xi)胞克隆的IgG產量(liang)存在(zai)較大(da)的(de)差異(yi)。將檢測結果與STUDIUS成(cheng)像(xiang)分析(xi)結果進行(xing)關聯(lian)，可進壹步優化(hua)細(xi)胞克隆的選(xuan)擇(ze)。

3. 數(shu)據處理與分析(xi)結果：利用STUDIUS的數據分析(xi)功(gong)能(neng)，對細(xi)胞克隆進行(xing)排名(ming)和(he)篩選(xuan)。結合(he)IgG產(chan)量檢測結果，篩選(xuan)出(chu)高(gao)IgG產率的細(xi)胞克隆，為後(hou)續(xu)生(sheng)產過程(cheng)提(ti)供優(you)質(zhi)種(zhong)子(zi)。

八(ba)、討(tao)論(lun)與總結

本(ben)實(shi)驗方(fang)法(fa)使用(yong)Solentim STUDIUS細(xi)胞分析(xi)儀進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG產率評估(gu)，實(shi)現了(le)從鋪板到生(sheng)長過程(cheng)中的(de)產(chan)率分析(xi)、排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)的(de)全(quan)過程(cheng)。STUDIUS具(ju)備(bei)的數(shu)據跟蹤(zong)、審計(ji)追(zhui)蹤(zong)和(he)多(duo)級(ji)密碼(ma)保(bao)護(hu)用戶訪(fang)問等功(gong)能(neng)，為細(xi)胞系(xi)開(kai)發提(ti)供了(le)可靠(kao)工具(ju)。實(shi)驗結果表明，STUDIUS在(zai)細(xi)胞IgG產率評估(gu)方面(mian)具(ju)有較高(gao)的準(zhun)確(que)性和(he)效率。

在(zai)使(shi)用STUDIUS進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG產率評估(gu)的過(guo)程(cheng)中，應(ying)註意以(yi)下幾點：

1. 細(xi)胞鋪板(ban)密度：根(gen)據細(xi)胞類型和(he)生(sheng)長特性，選(xuan)擇(ze)適(shi)當的鋪板密度，以(yi)保(bao)證細(xi)胞正常(chang)生(sheng)長和(he)產(chan)率評估(gu)的準(zhun)確(que)性。

2. 成像(xiang)分析(xi)時間(jian)點：根(gen)據細(xi)胞生(sheng)長速度和(he)產(chan)率變(bian)化，合(he)理(li)設置成像(xiang)分析(xi)時間(jian)點，以(yi)捕(bu)捉(zhuo)關鍵(jian)時期(qi)的細(xi)胞狀態(tai)。

3. 數據關聯(lian)與分析(xi)：將STUDIUS成像(xiang)分析(xi)結果與IgG產(chan)量(liang)檢測結果進行(xing)關聯(lian)，綜(zong)合(he)評估(gu)細(xi)胞IgG產率。利用STUDIUS的數據分析(xi)功(gong)能(neng)，優化細(xi)胞克隆的選(xuan)擇(ze)。

使(shi)用(yong)Solentim STUDIUS細(xi)胞成像(xiang)分析(xi)儀進(jin)行(xing)細(xi)胞IgG產率評估(gu)的方(fang)法(fa)，為生(sheng)物(wu)制藥領(ling)域(yu)提(ti)供了(le)高(gao)效、準(zhun)確(que)的(de)實(shi)驗手(shou)段。通過(guo)對細(xi)胞克隆的產率分析(xi)、排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)，有助(zhu)於(yu)提(ti)高(gao)重組(zu)蛋(dan)白類藥(yao)物(wu)的生(sheng)產效率和(he)質(zhi)量(liang)。

蘇(su)州阿爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu)提(ti)供的(de)STUDIUS通過(guo)整(zheng)合(he)來自(zi)VIPS PRO單細(xi)胞鋪板(ban)、Cell Metric®單克隆驗證和(he)克隆生(sheng)長監(jian)測(ce)以(yi)及(ji)ICON™的IgG產(chan)率評估(gu)，幫(bang)助(zhu)科學(xue)家能(neng)夠更(geng)快(kuai)、更(geng)自(zi)信(xin)地(di)做出(chu)決(jue)策(ce)。該軟(ruan)件(jian)平(ping)臺根(gen)據用戶(hu)定(ding)義(yi)的(de)參(can)數自(zi)動、即時地分析(xi)數據，縮短(duan)了(le)克隆的排名(ming)和(he)選(xuan)擇(ze)所(suo)需的時間。