光學(xue)顯微(wei)鏡(jing)的(de)觀(guan)察(cha)方(fang)式

更新(xin)時(shi)間(jian)：2024-05-31

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光學(xue)顯微(wei)鏡(jing)適用(yong)於多(duo)種(zhong)檢(jian)材，如(ru)組(zu)織(zhi)切片(pian)、活細(xi)胞、電(dian)路板等。不同檢(jian)材光(guang)學特性差異(yi)大，需使(shi)用(yong)不同觀(guan)察(cha)方(fang)式，主要(yao)有(you)明場(chang)、相(xiang)差、熒光、偏(pian)光、DIC、暗(an)場(chang)、霍夫(fu)曼相(xiang)襯(chen)七種方(fang)式。

壹臺光(guang)學顯微(wei)鏡(jing)可能(neng)擁(yong)有(you)壹種(zhong)或(huo)多(duo)種(zhong)觀(guan)察(cha)方(fang)式，今(jin)天(tian)我們(men)先來(lai)說(shuo)說(shuo)明(ming)場(chang)觀(guan)察(cha)方(fang)式。

（1）成像(xiang)原理(li)

明(ming)場(chang)觀(guan)察(cha)是(shi)光(guang)學顯微(wei)鏡(jing)最(zui)基(ji)礎的(de)觀(guan)察(cha)方(fang)式，其利用可(ke)見(jian)光（約(yue)400-700nm）作(zuo)為(wei)照(zhao)明光(guang)源(yuan)，光(guang)線(xian)相(xiang)位(wei)、照(zhao)射角(jiao)度(du)等性質(zhi)不(bu)作改變(bian)，直(zhi)接照(zhao)射(she)在(zai)樣品(pin)上進行(xing)成像(xiang)。

明(ming)場(chang)觀(guan)察(cha)有(you)透(tou)射(she)照(zhao)明和(he)反(fan)射照(zhao)明兩種(zhong)照明(ming)方(fang)式，前者(zhe)是照(zhao)明(ming)光(guang)線(xian)透(tou)過(guo)樣(yang)品後(hou)進(jin)入物鏡(jing)，主要(yao)適合(he)有(you)透(tou)明(ming)度(du)的(de)薄樣(yang)品；後(hou)者是(shi)照(zhao)明光線(xian)照(zhao)射到樣品(pin)後反(fan)射進(jin)入物鏡(jing)，主要(yao)適合(he)不透(tou)明(ming)的(de)厚樣(yang)品。

透(tou)射(she)與反(fan)射（落(luo)射）光路示意(yi)圖(tu)

（2）關鍵部(bu)件

明(ming)場(chang)觀(guan)察(cha)不(bu)需(xu)要(yao)特殊(shu)的(de)部(bu)件，其(qi)效(xiao)果(guo)主要(yao)受(shou)光(guang)源(yuan)和(he)聚光(guang)鏡(jing)影響(xiang)。光源(yuan)有(you)兩項(xiang)核心(xin)規(gui)格，色(se)溫和顯(xian)色(se)性。聚光(guang)鏡(jing)核心(xin)規(gui)格是(shi)數值孔(kong)徑(jing)。

傳(chuan)統(tong)以鹵(lu)素(su)燈等(deng)作(zuo)為(wei)光(guang)源(yuan)，其(qi)特點是(shi)色(se)溫偏(pian)暖(nuan)，約(yue)3000K，亮度(du)越(yue)低色(se)溫越(yue)暖(nuan)。人眼觀(guan)察(cha)較為(wei)舒(shu)適，顯(xian)色(se)性高，但壹(yi)般(ban)需要(yao)在(zai)光源(yuan)處(chu)使用(yong) RBD 日光濾(lv)光(guang)片(pian)或(huo)藍色(se)濾(lv)光(guang)片(pian)校(xiao)正(zheng)色(se)溫，否則對(dui)於樣本(ben)中(zhong)紅(hong)染、黃(huang)染等(deng)細(xi)節(jie)的(de)分辨(bian)很(hen)差。主要(yao)缺(que)點是(shi)發熱(re)大、使用(yong)不(bu)當(dang)容(rong)易(yi)燒(shao)，另外用濾(lv)色(se)片(pian) 校(xiao)正(zheng)色(se)溫會(hui)損(sun)失光(guang)強(qiang)，對(dui)拍(pai)照有(you)影響(xiang)。

使用(yong)技巧(qiao)：關鹵(lu)素(su)燈光(guang)源(yuan)前(qian)先把(ba)光強(qiang)調(tiao)低。以高光強(qiang)啟(qi)動(dong)鹵(lu)素(su)燈容(rong)易(yi)導(dao)致燈(deng)泡燒(shao)壞，調(tiao)低光強(qiang)再關，可以(yi)避(bi)免(mian)下(xia)次開(kai)燈(deng)時(shi)意(yi)外(wai)燒(shao)壞(huai)燈泡。LED光(guang)源(yuan)則基(ji)本(ben)不(bu)影(ying)響(xiang)，但養成好(hao)習慣(guan)總(zong)是(shi)有(you)益的(de)。

目(mu)前(qian)專業(ye)LED光(guang)源(yuan)已(yi)逐步(bu)成為(wei)主流，其色(se)溫恒(heng)定(ding)在(zai)5000K左右，接近(jin)日光的(de)平均色(se)溫，顯色(se)性較好，人眼觀(guan)察(cha)和(he)數字相(xiang)機成像(xiang)都(dou)有(you)較好效果(guo)。此外(wai)LED光源(yuan)功耗低亮度(du)高，壹般(ban)3W LED可以(yi)達到30W鹵(lu)素(su)燈光(guang)強(qiang)，方(fang)便即開(kai)即(ji)用，壽命(ming)長(chang)，免(mian)維(wei)護(hu)，因(yin)此(ci)明(ming)美(mei)大部(bu)分顯(xian)微(wei)鏡(jing)均默認采(cai)用(yong)LED作(zuo)為(wei)明(ming)場(chang)光源(yuan)，鹵(lu)素(su)燈則作(zuo)為(wei)可(ke)選(xuan)。

鹵(lu)素(su)燈照(zhao)明(ming)右圖(tu)LED燈(deng)照明

聚光(guang)鏡(jing)會(hui)有(you)倍(bei)數刻度(du)或(huo)者數值孔(kong)徑(jing)刻度(du)，壹般(ban)調(tiao)到物鏡(jing)對(dui)應的(de)倍(bei)數，或(huo)者比物鏡(jing)數值孔(kong)徑(jing)稍低的(de)數值即(ji)可(ke)。更精準的(de)調(tiao)試方式，拔(ba)出目(mu)鏡(jing)，邊調(tiao)節(jie)孔(kong)徑光闌(lan)邊(bian)從(cong)觀(guan)察(cha)筒(tong)觀(guan)察(cha)物鏡(jing)後焦(jiao)平面，當(dang)畫(hua)面占(zhan)視野(ye)3/4左右時(shi)效果(guo)好，但(dan)不建議(yi)頻繁(fan)這(zhe)樣操(cao)作，因(yin)為(wei)容(rong)易讓(rang)觀(guan)察(cha)筒(tong)進(jin)灰。

產品小知識(shi)1：除(chu)了數值孔(kong)徑(jing)，聚光(guang)鏡(jing)還有(you)消色(se)差、消球差等規(gui)格區別，在(zai)40X以上會(hui)對(dui)成像(xiang)質(zhi)量(liang)有(you)較大影響(xiang)，所以(yi)並不是數值孔(kong)徑(jing)高就(jiu)等(deng)於更好。

產(chan)品小知識(shi)2：如(ru)果(guo)您想使(shi)用(yong)超低倍(bei)2X物鏡(jing)，您需要(yao)選(xuan)配(pei)搖出式聚光(guang)鏡(jing)。

（3）成像(xiang)特(te)點

明(ming)場(chang)觀(guan)察(cha)能(neng)較好地呈現樣(yang)品色(se)彩(cai)，但(dan)襯(chen)度(du)較低，尤其(qi)是透(tou)射(she)照(zhao)明的(de)明場(chang)中(zhong)。在(zai)透(tou)射(she)照(zhao)明成像(xiang)過(guo)程中(zhong)，帶(dai)有(you)樣品(pin)信(xin)息的(de)光線(xian)與背景光(guang)線(xian)混(hun)合(he)在(zai)壹起(qi)，這(zhe)使樣(yang)品淺色(se)部(bu)分與背景對(dui)比度較低，遇到活細(xi)胞等(deng)透(tou)明(ming)樣(yang)品基(ji)本(ben)看(kan)不(bu)出細(xi)節(jie)。因(yin)此(ci)，該(gai)觀(guan)察(cha)方(fang)式適合(he)已經(jing)染色(se)樣品或(huo)本(ben)身有(you)顏色(se)的(de)樣品(pin)進行(xing)成像(xiang)。

特(te)點jpg

（4）主要(yao)應用(yong)

①醫(yi)學研(yan)究：HE、IHC等(deng)染色(se)病理(li)切(qie)片(pian)檢(jian)驗

組(zu)織(zhi)切片(pian)

明美(mei)研(yan)究級(ji)生物顯微(wei)鏡(jing)ML51-N明場(chang)觀(guan)察(cha)樣(yang)品(pin)圖(tu)

左圖(tu)：HE 組(zu)織(zhi)病理(li)切(qie)片(pian)樣品(pin) 右圖(tu)：IHC 免(mian)疫(yi)組(zu)化樣(yang)品(pin)

②材料(liao)分析：金(jin)相(xiang)組(zu)織(zhi) 、電(dian)路芯片(pian)等。

金(jin)相(xiang)顯微(wei)鏡(jing)

明美(mei)金(jin)相(xiang)顯微(wei)鏡(jing)MJ43

明美(mei)體(ti)視顯微(wei)鏡(jing)MZX100拍(pai)攝(she)的(de)蜜蜂

（5）明(ming)美(mei)產(chan)品推(tui)薦(jian)

①生物顯微(wei)

推(tui)薦(jian)產品：ML11/ML31/ML41/ML51

生物顯微(wei)鏡(jing)

配(pei)置白光LED光源(yuan)，成像(xiang)明(ming)亮清(qing)晰
采(cai)用(yong)無限遠(yuan)光(guang)路系統(tong)，可靈活升級(ji)配(pei)置
適(shi)用(yong)於教學(xue)、科研(yan)、醫(yi)學等(deng)場(chang)景

②金(jin)相(xiang)顯微(wei)鏡(jing)

推(tui)薦(jian)產品：MJ31/MJ33/MJ43/MJ41-LED/MJ42

金(jin)相(xiang)顯微(wei)鏡(jing)

可配(pei)置LED或(huo)鹵(lu)素(su)燈等(deng)光(guang)源(yuan)，滿(man)足(zu)不(bu)同觀(guan)察(cha)習慣(guan)
配(pei)置長(chang)工(gong)作(zuo)距(ju)離金(jin)相(xiang)物鏡(jing)，成像(xiang)清(qing)晰，對(dui)比度高
適用(yong)於工(gong)業(ye)、材(cai)料(liao)學(xue)等觀(guan)察(cha)場(chang)景

③體(ti)式顯微(wei)鏡(jing)

推(tui)薦(jian)產品：MZ62/MZ101

體視(shi)顯微(wei)鏡(jing)

獨(du)立雙光(guang)路系統(tong)設計(ji)，成像(xiang)具有(you)立體(ti)感
可配(pei)備透(tou)射(she)與反(fan)射LED光(guang)源(yuan)，適(shi)配(pei)不同檢(jian)材
可(ke)適用於常(chang)規生物醫(yi)學檢(jian)驗，科研(yan)研(yan)究和(he)工(gong)業(ye)檢(jian)測等(deng)高精度(du)觀(guan)察(cha)領(ling)域(yu)

④顯微(wei)鏡(jing)相(xiang)機

推(tui)薦(jian)產品：MSX11/ MSX2 /MSX1/MDX

顯微(wei)鏡(jing)相(xiang)機

大靶(ba)面尺(chi)寸感光芯(xin)片(pian)，高像素(su)設計(ji)，細節(jie)成像(xiang)更清晰
靈敏度高，色(se)彩(cai)還(hai)原性好
軟(ruan)件易用，可(ke)搭配(pei)明美(mei)及其(qi)他(ta)品(pin)牌顯(xian)微(wei)鏡(jing)

透(tou)射(she)與反(fan)射（落(luo)射）光路示意(yi)圖(tu)

明(ming)美(mei)顯(xian)微(wei)鏡(jing)

生物顯微(wei)鏡(jing)

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