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SDS電(dian)泳和瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)電泳有(you)什(shen)麽(me)不同
更(geng)新時間(jian):2023-12-08
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SDS電泳(yong)和瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)電泳是(shi)兩(liang)種常(chang)用的(de)凝膠電泳(yong)技術(shu),它們(men)在(zai)實(shi)驗(yan)設計(ji)和應(ying)用(yong)上有壹(yi)些不同。其中,壹個(ge)明顯(xian)的區(qu)別(bie)是(shi)使用(yong)的電(dian)泳板的(de)方向。通常(chang),SDS電(dian)泳(yong)使用垂(chui)直(zhi)板(ban),而(er)瓊脂糖電(dian)泳(yong)使用水平板(ban)。這裏(li)小(xiao)編(bian)將(jiang)帶妳(ni)探討其中的原(yuan)因(yin)。

開(kai)始之前,我(wo)們(men)需(xu)要了(le)解SDS電泳和瓊脂糖電(dian)泳(yong)的基本原(yuan)理。SDS電(dian)泳是(shi)壹種(zhong)將(jiang)蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)根據(ju)其大小和電荷進(jin)行(xing)分(fen)離的技術(shu)。在(zai)SDS電(dian)泳(yong)中,樣(yang)品(pin)中的蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)被SDS(十(shi)二烷基(ji)硫(liu)酸鈉)包(bao)圍,這(zhe)種(zhong)物質可(ke)以(yi)破壞(huai)蛋(dan)白質(zhi)之(zhi)間(jian)的(de)氫(qing)鍵,使(shi)蛋(dan)白質(zhi)變性(xing)並帶負(fu)電荷。由於SDS的分子量比蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)小得(de)多(duo),因(yin)此(ci)它們(men)在(zai)電(dian)場(chang)中移(yi)動得(de)更(geng)快。這(zhe)就(jiu)使(shi)得蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)的大(da)小和電荷成為影(ying)響它們(men)移(yi)動速(su)度的主(zhu)要因(yin)素。在(zai)垂(chui)直(zhi)板(ban)上,樣(yang)品(pin)從負(fu)極(ji)向正極(ji)移(yi)動,較(jiao)大的(de)蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)由於移(yi)動速(su)度較慢而出現在下方(fang),較(jiao)小(xiao)的分子則(ze)出現在上方。
另(ling)壹(yi)方面, 瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)電泳通常(chang)用(yong)於分離DNA片(pian)段(duan)。瓊脂糖是(shi)壹種(zhong)天然(ran)的凝膠(jiao),具有(you)很高的分(fen)子量。在瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)中,DNA片(pian)段(duan)根據(ju)其大小和電荷進(jin)行(xing)分(fen)離。在水平板(ban)上,樣(yang)品(pin)從負(fu)極(ji)向正極(ji)移(yi)動。較(jiao)大的(de)DNA片(pian)段(duan)由於移(yi)動速(su)度較慢而出現在下方(fang),較(jiao)小(xiao)的分子則(ze)出現在上方。

那麽(me),為什(shen)麽(me)SDS電泳(yong)使用垂(chui)直(zhi)板(ban)而(er)瓊脂糖電(dian)泳(yong)使用水平板(ban)呢(ne)?這主要是(shi)由於它們(men)的(de)實(shi)驗(yan)目的(de)和凝膠的性(xing)質不同。在SDS電泳(yong)中,由於樣(yang)品(pin)中的蛋白質(zhi)或(huo)DNA片(pian)段(duan)被SDS包(bao)圍,它們(men)在(zai)電(dian)場(chang)中的移(yi)動速(su)度與凝(ning)膠的(de)孔(kong)徑(jing)大(da)小關(guan)系(xi)不大。因(yin)此(ci),使(shi)用垂(chui)直(zhi)板(ban)可(ke)以(yi)更(geng)好(hao)地控制(zhi)樣(yang)品(pin)在凝膠(jiao)中的移(yi)動速(su)度,從而(er)實(shi)現更(geng)精確(que)的(de)分(fen)離。
相比之下(xia),在(zai)瓊脂糖電(dian)泳(yong)中,DNA片(pian)段(duan)的移(yi)動速(su)度受到凝膠(jiao)孔徑(jing)大(da)小(xiao)的(de)影(ying)響。水平板(ban)上使用(yong)的(de)凝膠通常(chang)具有(you)更(geng)大的孔徑(jing),這(zhe)使得(de)DNA片(pian)段(duan)可(ke)以(yi)更(geng)快地通過(guo)凝(ning)膠。因(yin)此(ci),使(shi)用水平板(ban)可(ke)以(yi)縮短(duan)電泳(yong)時間(jian)並(bing)提(ti)高分離效率。
此外,使用(yong)垂(chui)直(zhi)板(ban)還(hai)是(shi)水平板(ban)也與(yu)實(shi)驗(yan)設計(ji)和應(ying)用(yong)有(you)關(guan)。例(li)如,對(dui)於需(xu)要精(jing)細(xi)分(fen)辨率的蛋(dan)白質(zhi)分(fen)離或在研究蛋白質(zhi)分(fen)子量時,通常(chang)使(shi)用(yong)垂(chui)直(zhi)板(ban)。而(er)在對(dui)DNA片(pian)段(duan)進(jin)行(xing)快速(su)分離或高通量篩(shai)選(xuan)時,水平板(ban)則(ze)更(geng)為常(chang)見。

綜(zong)上所述,SDS電(dian)泳使(shi)用垂(chui)直(zhi)板(ban)主(zhu)要是(shi)為了(le)更(geng)好(hao)地控制(zhi)樣(yang)品(pin)的移(yi)動速(su)度並實(shi)現更(geng)精確(que)的(de)分(fen)離,而瓊脂糖電(dian)泳(yong)使用水平板(ban)則(ze)是(shi)為了(le)提高分離效率並方(fang)便(bian)高通量篩(shai)選(xuan)。這種區(qu)別(bie)反映(ying)了(le)這兩(liang)種技術(shu)在(zai)實(shi)驗(yan)設計(ji)和應(ying)用(yong)上的不同需(xu)求(qiu)和特點。
更(geng)多(duo)蛋白質(zhi)電(dian)泳預(yu)制(zhi)膠,瓊脂糖凝(ning)膠(jiao)電泳問(wen)題(ti)可(ke)以(yi)關(guan)註(zhu)我(wo)們(men)哦!
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