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蛋白質(zhi)的(de)離(li)心(xin)機(ji)離(li)心(xin)分離(li)與(yu)純(chun)化(hua)
更(geng)新(xin)時間(jian):2023-07-12
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離(li)心(xin)機(ji)在(zai)生(sheng)物(wu)學(xue)及(ji)醫(yi)學(xue)研(yan)究中被廣(guang)泛應(ying)用(yong)於蛋白質(zhi)分(fen)離(li)和(he)純(chun)化(hua)實(shi)驗(yan)。本文(wen)將詳細(xi)介紹(shao)使(shi)用離(li)心(xin)機(ji)進(jin)行蛋白質(zhi)分(fen)離(li)與(yu)純(chun)化(hua)的(de)實驗(yan)方法(fa),並(bing)提供詳盡的(de)操作(zuo)步驟(zhou)。
壹(yi)、實(shi)驗(yan)準備(bei)
準備(bei)所(suo)需試劑和(he)儀器(qi):離(li)心(xin)機(ji)、離(li)心(xin)管(guan)(0.5ml離(li)心(xin)管(guan),1.5ml離(li)心(xin)管(guan),2ml離(li)心(xin)管(guan),5ml離(li)心(xin)管(guan),10ml離(li)心(xin)管(guan),15ml離(li)心(xin)管(guan),50ml 離(li)心(xin)管(guan))、顯微(wei)鏡、磷(lin)酸(suan)鹽緩(huan)沖液、樣品(含蛋白質(zhi)的(de)混合(he)物(wu))等。

二、樣(yang)品離(li)心(xin)分離(li)
1. 將(jiang)樣品註入離(li)心(xin)管(guan):將樣(yang)品(含蛋白質(zhi)的(de)混合(he)物(wu))註入清(qing)潔(jie)的離(li)心(xin)管(guan)中。確(que)保離(li)心(xin)管(guan)不超(chao)過容(rong)量(liang)的(de)2/3,以(yi)防止(zhi)離(li)心(xin)時的溢出(chu)。
2. 平衡樣(yang)品:將離(li)心(xin)管(guan)放入(ru)冷(leng)藏(zang),使(shi)樣品在溫度(du)壹(yi)致(zhi)下(xia)平衡壹(yi)段時間(jian)。
三(san)、選(xuan)擇合適(shi)的(de)離(li)心(xin)機(ji)參(can)數
1. 選擇合適(shi)的(de)轉(zhuan)速(su)和(he)離(li)心(xin)時間(jian):根據(ju)樣(yang)品的特性和分離(li)需求,選(xuan)擇合適(shi)的(de)離(li)心(xin)機(ji)轉(zhuan)速(su)和(he)離(li)心(xin)時間(jian)。通常(chang),較高的(de)轉(zhuan)速(su)和(he)較長(chang)的離(li)心(xin)時間(jian)能(neng)夠(gou)實(shi)現(xian)更(geng)好的分(fen)離(li)效(xiao)果。
2. 設定離(li)心(xin)機(ji)參(can)數:根據(ju)實(shi)驗(yan)需求,在(zai)離(li)心(xin)機(ji)上(shang)設(she)定(ding)所(suo)選(xuan)的轉(zhuan)速(su)和(he)離(li)心(xin)時間(jian)。
3. 使(shi)用轉(zhuan)子:根據(ju)離(li)心(xin)機(ji)型(xing)號,安(an)裝(zhuang)並(bing)選擇合適(shi)的(de)轉(zhuan)子,確(que)保樣(yang)品均勻分布並(bing)提供較(jiao)佳(jia)離(li)心(xin)效果。
四、離(li)心(xin)機(ji)離(li)心(xin)
1. 將離(li)心(xin)管(guan)放入(ru)離(li)心(xin)機(ji)中:將(jiang)樣(yang)品放入(ru)預先(xian)設(she)定好參(can)數的離(li)心(xin)機(ji)中。
2. 啟(qi)動離(li)心(xin)機(ji):關(guan)閉(bi)離(li)心(xin)機(ji)蓋(gai),啟(qi)動離(li)心(xin)機(ji)開(kai)始離(li)心(xin)過程。確(que)保離(li)心(xin)機(ji)蓋(gai)全(quan)部(bu)關(guan)閉(bi),以保(bao)持安(an)全(quan)。
3. 分離(li)過程:離(li)心(xin)機(ji)將(jiang)通(tong)過高速(su)旋(xuan)轉(zhuan)的方式(shi)對樣本進(jin)行離(li)心(xin),中途(tu)不可(ke)打(da)開(kai)蓋(gai)子(zi)。
五、收集分(fen)離(li)後(hou)的物(wu)質(zhi)
1. 離(li)心(xin)結束後(hou),打(da)開(kai)離(li)心(xin)機(ji)蓋(gai),小(xiao)心(xin)取出離(li)心(xin)管(guan)。
2. 分離(li)沈(chen)澱和上(shang)清(qing)液:根據(ju)需要(yao),將離(li)心(xin)管(guan)中的(de)上(shang)清(qing)液和沈(chen)澱吸取到不同(tong)的離(li)心(xin)管(guan)中。
六、純(chun)化(hua)蛋(dan)白質(zhi)
1. 濃縮(suo)蛋白質(zhi):使(shi)用適(shi)當的方法(fa)(如濃縮(suo)離(li)心(xin)技(ji)術(shu)、超(chao)濾或聚(ju)集等)從上(shang)清(qing)液中濃縮(suo)目標蛋白質(zhi)。
2. 蛋(dan)白質(zhi)分(fen)析(xi):使(shi)用適(shi)當的蛋(dan)白質(zhi)分(fen)析(xi)方法(fa)(如SDS-PAGE、Western blot等)對樣(yang)品進(jin)行蛋白質(zhi)鑒(jian)定(ding)和(he)分(fen)析(xi)。
3. 純(chun)化(hua)蛋(dan)白質(zhi):根(gen)據(ju)需要(yao),使(shi)用柱(zhu)層(ceng)析(xi)、電(dian)泳等技(ji)術(shu),進(jin)壹步純(chun)化(hua)目(mu)標蛋白質(zhi)。
七(qi)、實(shi)驗(yan)後(hou)處理(li)
1. 清(qing)洗(xi)離(li)心(xin)機(ji)和(he)離(li)心(xin)管(guan):完成(cheng)實驗(yan)後(hou),清(qing)洗(xi)離(li)心(xin)機(ji)和(he)離(li)心(xin)管(guan),確(que)保無任(ren)何汙染物(wu)殘(can)留(liu)。
2. 數據(ju)記錄和(he)分(fen)析(xi):將(jiang)蛋白質(zhi)分(fen)離(li)和(he)純(chun)化(hua)的(de)關(guan)鍵(jian)實(shi)驗(yan)參(can)數、結果(guo)和觀(guan)察記錄下(xia)來(lai),並(bing)進(jin)行適(shi)當的數據(ju)分(fen)析(xi)。

使(shi)用離(li)心(xin)機(ji)進(jin)行蛋白質(zhi)分(fen)離(li)與(yu)純(chun)化(hua)的(de)實驗(yan)方法(fa)是壹(yi)種(zhong)常用(yong)的生(sheng)物(wu)學(xue)技(ji)術(shu)。通(tong)過適(shi)當的實(shi)驗(yan)準備(bei)、選擇合適(shi)的(de)離(li)心(xin)機(ji)參(can)數、執行離(li)心(xin)過程並(bing)進(jin)行樣品的分離(li)和(he)純(chun)化(hua),可(ke)以獲得目(mu)標蛋白質(zhi),並(bing)為後(hou)續蛋(dan)白質(zhi)分(fen)析(xi)和(he)鑒(jian)定(ding)提供良(liang)好的條(tiao)件。需要(yao)註意的是,在(zai)實(shi)驗(yan)操作(zuo)過程中要(yao)確(que)保安(an)全(quan),嚴格(ge)遵守(shou)實(shi)驗(yan)室(shi)安全(quan)操作(zuo)規程。
蘇(su)州阿(e)爾(er)法生(sheng)物(wu)的(de)實(shi)驗(yan)室(shi)離(li)心(xin)機(ji)設(she)備(bei)包含(han)了多(duo)個(ge)型號,便(bian)於滿足實驗(yan)室(shi)的不同(tong)需求。這些(xie)型(xing)號包(bao)括超(chao)速(su)離(li)心(xin)機(ji)、高速(su)離(li)心(xin)機(ji)、冷(leng)凍(dong)離(li)心(xin)機(ji)、落地(di)式離(li)心(xin)機(ji)、臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機(ji)、低速(su)離(li)心(xin)機(ji)、低速(su)臺(tai)式離(li)心(xin)機(ji)、便(bian)攜式(shi)離(li)心(xin)機(ji)、小(xiao)型(xing)離(li)心(xin)機(ji)和(he)迷(mi)妳(ni)離(li)心(xin)機(ji)等。如果(guo)您(nin)需要(yao)了解(jie)更(geng)多(duo)離(li)心(xin)機(ji)的(de)報價(jia)以及(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)儀器(qi)、實(shi)驗(yan)試劑(ji)、實驗(yan)耗(hao)材采(cai)購(gou)相(xiang)關(guan)信息(xi),請進(jin)入蘇(su)州阿(e)爾(er)法生(sheng)物(wu)進(jin)行咨詢。
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