細胞(bao)培(pei)養緩沖(chong)液有哪(na)些(xie)

細胞(bao)培(pei)養緩沖(chong)液有哪(na)些(xie)？

壹、細胞(bao)培(pei)養使(shi)用的(de)碳(tan)酸(suan)氫鈉

碳(tan)酸(suan)氫鈉（NaHCO3）是細胞(bao)培(pei)養中常(chang)用(yong)的(de)緩沖(chong)液，用於在(zai)4–10%二(er)氧(yang)化碳存(cun)在(zai)的(de)情況(kuang)下(xia)維(wei)持培養(yang)基(ji)的(de) pH 值。此外，碳(tan)酸(suan)氫鈉提(ti)供(gong)壹些營養價值，且很少(shao)對(dui)細胞(bao)有(you)毒。

培養基中碳(tan)酸(suan)氫鈉的(de)最(zui)終濃(nong)度(du)取決於培養基(ji)的(de)配方(fang)和培養(yang)箱(xiang)的(de)二(er)氧(yang)化碳濃(nong)度(du)。根(gen)據(ju)所(suo)用碳(tan)酸(suan)氫鈉的(de)濃(nong)度(du)，建議使(shi)用不(bu)同(tong)的(de) CO2 濃(nong)度(du)。如(ru)果(guo)培(pei)養(yang)基(ji)配方(fang)包括(kuo)：

NaHCO3（g/L）<1.5，需要(yao)濃(nong)度(du)為(wei)4%的(de) CO2

NaHCO3（g/L）1.5–2.2，需要(yao)濃(nong)度(du)為(wei)5%的(de) CO2

NaHCO3（g/L）2.2–3.4，需要(yao)濃(nong)度(du)為(wei)7%的(de) CO2

NaHCO3（g/L）>3.5，需要(yao)濃(nong)度(du)為(wei)10%的(de) CO2

二(er)、細胞(bao)培(pei)養中使(shi)用的(de) HEPES 緩沖(chong)液

盡管(guan)碳酸(suan)氫鹽因其營養(yang)價值而(er)成為(wei)常(chang)用(yong)的(de)細胞(bao)培(pei)養緩沖(chong)液，但與(yu) HEPES 緩沖(chong)液相(xiang)比(bi)，碳酸(suan)氫鹽的(de)緩沖(chong)能力在(zai)生理 pH 值時(shi)有所(suo)下(xia)降。HEPES 對(dui)細胞(bao)沒(mei)有營養價值，但可(ke)以添加到 pH 7.2 至(zhi) 7.6 的(de)緩沖(chong)細胞(bao)培(pei)養基中。因此，當(dang)需要(yao)在(zai) CO2 培養箱(xiang)外長(chang)時(shi)間(jian)處理細胞(bao)培(pei)養物(wu)時(shi)，添加 HEPES 可(ke)提(ti)供額外的(de)緩沖(chong)能力。

Gibco HEPES 是壹種兩(liang)性離(li)子(zi)性(xing)的(de)有(you)機(ji)化學(xue)緩沖(chong)劑，被(bei)歸(gui)類(lei)為(wei)" Good "緩沖(chong)液，源(yuan)於 Norman Good 博(bo)士(shi)和他的(de)同(tong)事(shi)在(zai)1966年發(fa)現(xian)的(de)壹組緩沖(chong)液（Good 等人(ren)，Biochemistry 1966）。

"Good 緩沖(chong)液"（如(ru) HEPES）具有以下(xia)特(te)征(zheng)：

l pKa 值在(zai)6.0至8.0之(zhi)間(jian)

l 高溶(rong)解度

l 膜不(bu)通(tong)透性

l 對(dui)生化反應(ying)的(de)影(ying)響有(you)限

l 較(jiao)低的(de)可(ke)見(jian)光和紫(zi)外光吸(xi)收(shou)率(lv)

l 化學(xue)和酶促(cu)穩(wen)定性

l 易於制備(bei)

細胞(bao)培(pei)養基中 HEPES 的(de)水平(ping)可(ke)以(yi)從 10 mM 到 25 mM 不(bu)等(deng)。在(zai) Gibco DMEM 中，HEPES 的(de)濃(nong)度(du)為(wei) 25 mM。然而(er)，在(zai) Gibco MEM/F12 中，其濃(nong)度(du)為(wei) 15 mM。常(chang)用(yong)的(de)濃(nong)度(du)為(wei) 25 mM。

三(san)、其他細胞(bao)培(pei)養添加劑

1.  HOCH2CH2SH

HOCH2CH2SH 它(ta)能夠清(qing)除(chu)羥基自(zi)由基（等(deng)），可作(zuo)為(wei)生物(wu)抗(kang)氧(yang)化劑。羥(qiang)基(ji)可溶於水並(bing)可(ke)降(jiang)低(di)揮(hui)發性。

2.氨基(ji)酸(suan)溶(rong)液

要(yao)增加培養細胞(bao)的(de)活(huo)性(xing)並(bing)刺(ci)激(ji)生長(chang)，可向培(pei)養(yang)基(ji)中添加氨(an)基(ji)酸(suan)添加劑。此外，添加氨(an)基(ji)酸(suan)添加劑可(ke)提(ti)供營養並(bing)減(jian)輕(qing) 體(ti)外細胞(bao)的(de)生物(wu)合(he)成負(fu)擔。 在(zai)蒸餾水中制(zhi)備(bei)，該(gai)溶(rong)液中的(de)非(fei)必(bi)需氨基(ji)酸(suan)濃(nong)度(du)是 MEM-α 培(pei)養(yang)基中濃(nong)度(du)的(de)100倍(bei)。

3. HAT 添加劑

稀(xi)釋(shi)後的(de) HAT 適合(he)用作(zuo)融(rong)合(he)後選(xuan)擇培(pei)養基(ji)，以去(qu)除(chu)未(wei)融(rong)合(he)或(huo)自(zi)融(rong)合(he)的(de) HGPRT-骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞(bao)。  葉酸(suan)拮(jie)抗(kang)劑、氨(an)基(ji)喋呤抑制(zhi) 從頭(tou) 核苷(gan)生物(wu)合(he)成途(tu)徑。

4. MEM 維(wei)生素(su)溶(rong)液

向培(pei)養(yang)基(ji)中添加 MEM 維(wei)生素(su)溶(rong)液可增(zeng)強(qiang)培養中的(de)細胞(bao)生長(chang)和活(huo)力，並(bing)減(jian)少(shao)體(ti)外細胞(bao)的(de)生物(wu)合(he)成負(fu)擔。在(zai)0.85%的(de)鹽水中制(zhi)備(bei)而(er)成，該(gai)溶(rong)液中的(de)維(wei)生素(su)濃(nong)度(du)是標準(zhun) MEM 培養(yang)基中濃(nong)度(du)的(de)100倍(bei)。

5.丙酮(tong)酸(suan)鈉(na)

丙酮(tong)酸(suan)鈉(na)通(tong)常(chang)作(zuo)為(wei)額外的(de)碳(tan)來(lai)源(yuan)補充到細胞(bao)培(pei)養基中。用(yong)於細胞(bao)培(pei)養的(de) Gibco 丙酮(tong)酸(suan)鈉(na)以100 mM（100倍(bei)）溶液的(de)形(xing)式(shi)提(ti)供(gong)，最(zui)終濃(nong)度(du)為(wei) 11,004 mg/L。

6.植(zhi)物(wu)凝(ning)集(ji)素(su)

植(zhi)物(wu)凝(ning)集(ji)素(su)是由紅腰(yao)豆菜(cai)豆粗提取物(wu)制(zhi)成的(de)溶(rong)液。當以(yi)壹定濃(nong)度(du)應(ying)用(yong)時(shi)，這種添加劑可(ke)以(yi)在(zai)體(ti)外誘導各(ge)種哺乳動(dong)物(wu)單(dan)核(he)細胞(bao)中的(de)芽(ya)基(ji)發(fa)育(yu)。

蘇州阿爾法(fa)生物(wu)與(yu)海星生物(wu)深(shen)度(du)合(he)作(zuo)提(ti)供以下(xia)產品(pin)與(yu)服(fu)務：

HyCyte™ 幹(gan)細胞(bao)、原(yuan)代(dai)細胞(bao)、細胞(bao)系(xi)、三(san)系誘導培(pei)養試(shi)劑、專用培(pei)養基(ji)、培養基(ji)、基(ji)因編(bian)輯(ji)試劑盒(he)、細胞(bao)株現(xian)貨(huo)、細胞(bao)專用血清(qing)等(deng)細胞(bao)生物(wu)學(xue)試(shi)劑。

提(ti)供(gong)的(de)服(fu)務包括(kuo)：CRISPR-Cas9細胞(bao)基(ji)因編(bian)輯(ji)、載體(ti)構建,病(bing)毒包(bao)裝,分子量標準(zhun)品(pin)，突變基因標準(zhun)品(pin)，融(rong)合(he)基因標準(zhun)品(pin)，細胞(bao)穩(wen)轉(zhuan)，細胞(bao)幹(gan)擾(rao)等服(fu)務。

 蘇州阿爾法(fa)提(ti)供的(de)過(guo)氧(yang)化氫消毒(du)液、季銨鹽消(xiao)毒(du)劑、復方季銨鹽消(xiao)毒(du)液、殺孢子劑、醇(chun)類(lei)消毒(du)液、濃(nong)縮(suo)消毒液、除(chu)黴菌消毒液、無(wu)塵(chen)布、潔凈抹(mo)布、滅菌拖(tuo)把等(deng)廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)於生命科學(xue)、制(zhi)藥(yao)企(qi)業、醫(yi)藥研發、疾控防(fang)禦、檢驗(yan)檢疫等多(duo)種場景(jing)。