細(xi)胞(bao)微(wei)絲(si)骨架染色(se)失敗的(de)原(yuan)因(yin)及(ji)解決(jue)辦(ban)法(fa)

微絲(si)骨(gu)架(jia)染(ran)色常(chang)見(jian)問題(ti)及(ji)解決(jue)方案(an)

  微絲骨架是細胞的(de)壹種(zhong)重(zhong)要(yao)組(zu)成(cheng)部分，其主要(yao)由微(wei)絲和微管兩(liang)部分組(zu)成(cheng)。微絲(si)是壹(yi)種(zhong)細(xi)胞(bao)內(nei)直(zhi)徑約(yue)為7納米的(de)蛋白(bai)質(zhi)纖維(wei)，主(zhu)要(yao)由(you)肌動蛋(dan)白(bai)組(zu)成(cheng)，參與(yu)細胞(bao)的(de)運動、收(shou)縮(suo)和細胞(bao)分(fen)裂等過程(cheng)。微(wei)管則(ze)是(shi)壹種(zhong)細(xi)胞(bao)內(nei)直(zhi)徑約(yue)為25納米的(de)管狀結構，主(zhu)要由(you)α-和β-微管蛋(dan)白(bai)組(zu)成(cheng)，參與(yu)細胞(bao)的(de)分裂、纖毛(mao)和鞭毛(mao)的(de)運動等(deng)過(guo)程(cheng)。

微(wei)絲(si)骨架染色無(wu)法(fa)染(ran)上(shang)的(de)原(yuan)因(yin)可能(neng)有(you)以下(xia)幾(ji)點：
染色劑選擇(ze)不(bu)當：不(bu)同的(de)染色(se)劑對微絲骨(gu)架(jia)的(de)染色(se)效(xiao)果不同，如果使用(yong)的(de)染色(se)劑不適合微(wei)絲(si)骨(gu)架的(de)染色(se)，則(ze)會導致(zhi)染(ran)色失敗。例(li)如，熒(ying)光素酰亞胺（FITC）和*基氨基(ji)甲(jia)酸（TRITC）常(chang)用(yong)於微(wei)絲(si)骨架(jia)的(de)染色(se)，但(dan)如果濃度或(huo)pH值(zhi)不(bu)合(he)適(shi)，則(ze)會影響(xiang)染色(se)效(xiao)果。
細胞處理(li)不(bu)當：在進行微(wei)絲(si)骨架染(ran)色(se)前(qian)，需(xu)要對(dui)細胞進行透(tou)明(ming)化(hua)處理，以便(bian)染色(se)劑能(neng)夠(gou)進入(ru)到(dao)細胞(bao)內(nei)部。如果透明(ming)化(hua)處理不當，則(ze)會影響(xiang)染色(se)效(xiao)果。
此(ci)外，在細胞處(chu)理過程(cheng)中，如(ru)果細胞質內(nei)含有(you)過(guo)多的(de)脂(zhi)類(lei)物質、蛋白(bai)質(zhi)或(huo)其他(ta)雜質(zhi)，則(ze)會影響(xiang)染色(se)效(xiao)果。
染色時間(jian)過(guo)長(chang)或(huo)過(guo)短(duan)：染(ran)色(se)時間(jian)過(guo)長(chang)會導致(zhi)染(ran)色劑的(de)吸附(fu)飽和，從而無法(fa)繼(ji)續染色(se)；染色(se)時間(jian)過(guo)短則(ze)會導致(zhi)染(ran)色劑未(wei)能(neng)充分(fen)進(jin)入細(xi)胞內(nei)部，從而染色(se)效(xiao)果不佳。
光學(xue)設(she)備(bei)問題(ti)：染(ran)色後(hou)檢測時(shi)，如果使用(yong)的(de)顯微鏡(jing)或(huo)熒(ying)光(guang)顯微鏡(jing)出現(xian)了(le)問題(ti)，例(li)如光(guang)源亮(liang)度不足(zu)、濾(lv)鏡(jing)汙(wu)染(ran)等(deng)，也會導致(zhi)微(wei)絲骨架染色(se)無(wu)法(fa)染(ran)上(shang)。
針對微(wei)絲(si)骨(gu)架染色(se)無法(fa)染(ran)上(shang)的(de)原(yuan)因(yin)，可以采取(qu)以下(xia)解決(jue)辦(ban)法(fa)：
l 染(ran)色(se)劑選擇(ze)合(he)適(shi)的(de)染色(se)劑，例(li)如FITC和TRITC常(chang)用(yong)於微(wei)絲(si)骨架(jia)的(de)染色(se)。在選擇(ze)染(ran)色(se)劑時，需(xu)要考慮(lv)其濃度(du)、pH值等(deng)因(yin)素，以確(que)保染色效(xiao)果良好。
l 細胞(bao)處(chu)理細胞(bao)處理(li)前(qian)需(xu)要進(jin)行透(tou)明(ming)化(hua)處理，以便(bian)染色(se)劑能(neng)夠(gou)進入(ru)到(dao)細胞(bao)內(nei)部。在透明(ming)化(hua)處理過程(cheng)中，需(xu)要註(zhu)意處理時間(jian)、溫度、濃(nong)度(du)等(deng)因(yin)素，以確(que)保透明(ming)化(hua)效(xiao)果良好。
l 染色(se)時(shi)間(jian)調(tiao)整染色(se)時(shi)間(jian)需(xu)要根(gen)據(ju)染(ran)色(se)劑的(de)特(te)性和細胞(bao)類(lei)型的(de)不同(tong)進行調(tiao)整。如果染色時間(jian)過(guo)長(chang)或(huo)過(guo)短(duan)都(dou)會影響(xiang)染色(se)效(xiao)果，因(yin)此(ci)需(xu)要根(gen)據(ju)實驗(yan)需(xu)要進(jin)行相(xiang)應(ying)的(de)調(tiao)整。
l 光學(xue)設(she)備(bei)檢查(zha)染色(se)後(hou)檢測時(shi)，需(xu)要確(que)保使用(yong)的(de)顯微鏡(jing)或(huo)熒(ying)光(guang)顯微鏡(jing)正常(chang)運行，例(li)如光(guang)源亮(liang)度、濾(lv)鏡(jing)清潔等都需(xu)要檢查(zha)，以確(que)保染色效(xiao)果的(de)準(zhun)確(que)性(xing)。
l 增(zeng)加染色(se)劑濃度如果染色效(xiao)果不佳，可以適(shi)當增(zeng)加染色(se)劑的(de)濃度(du)，以提高染色(se)效(xiao)果。
l 更換(huan)染色方(fang)法(fa)如(ru)果以上(shang)方法(fa)都(dou)無(wu)效(xiao)，可以嘗試使用(yong)不(bu)同(tong)的(de)染色(se)方法(fa)，例(li)如免(mian)疫染(ran)色、原(yuan)位交等方法(fa)，以尋(xun)找更適(shi)合(he)的(de)染色(se)方法(fa)。
     蘇(su)州(zhou)阿爾法(fa)生(sheng)物實驗(yan)器(qi)材(cai)有限公(gong)司14年專註(zhu)生(sheng)物實驗(yan)室儀(yi)器(qi)設(she)備(bei)&耗材(cai)綜合供應(ying)，提供多能(neng)幹(gan)細(xi)胞(bao)，成(cheng)骨誘(you)導分(fen)化(hua)培養(yang)基(ji),骨(gu)髓幹(gan)細(xi)胞(bao)、各類(lei)腫(zhong)瘤(liu)細胞、臍(qi)帶血幹(gan)細(xi)胞(bao)等(deng)細(xi)胞株、細(xi)胞(bao)系、細胞培養(yang)試(shi)劑、細胞培養(yang)耗(hao)材(cai)、細胞培(pei)養(yang)搖(yao)床、生(sheng)物反(fan)應(ying)器(qi)、 實驗(yan)室儀(yi)器(qi)、實驗(yan)室設備(bei)、實驗(yan)室消(xiao)毒(du)劑等上千款產品(pin)，品(pin)類(lei)豐(feng)富(fu)齊(qi)全，可根據(ju)您(nin)的(de)需(xu)求，提供樣機體驗(yan)性能(neng)服務。熱(re)誠(cheng)歡(huan)迎大(da)家(jia)的(de)咨(zi)詢(xun)。