細(xi)胞轉染(ran)方法(fa)有哪(na)些(xie)

細胞轉染(ran)方法(fa)有哪(na)些(xie)

細(xi)胞轉染(ran)技(ji)術是壹種常(chang)見的實(shi)驗(yan)室細胞(bao)培(pei)養(yang)技(ji)術，主(zhu)要(yao)應(ying)用於生(sheng)命科學研究領域、藥物(wu)研發(fa)、新(xin)藥開發(fa)等(deng)領域。 
      細胞(bao)轉染(ran)技(ji)術可(ke)以分(fen)為體(ti)外(wai)轉染(ran)和(he)體(ti)內(nei)轉(zhuan)染(ran)兩種技(ji)術。體(ti)外(wai)轉染(ran)是指(zhi)將遺(yi)傳(chuan)物(wu)質（例(li)如核酸(suan) - DNA或(huo)RNA）遞(di)送(song)到(dao)培(pei)養(yang)的細胞（通(tong)常(chang)是癌(ai)細胞系）中(zhong)。 體(ti)內 轉(zhuan)染(ran)是指(zhi)將小(xiao)分(fen)子基因(yin)片(pian)段（如治療性 siRNA、質粒(li) DNA、小(xiao)蛋(dan)白(bai)等(deng)）遞(di)送(song)至靶組織(zhi)。細胞轉(zhuan)染可(ke)以使用自行(xing)使用轉染(ran)試(shi)劑盒(he)進行(xing)細(xi)胞(bao)轉染操(cao)作，或(huo)者(zhe)由(you)生(sheng)物(wu) CRO所(suo)提(ti)供(gong)的(de)可(ke)以獲(huo)得 GLP 認證(zheng)的細(xi)胞(bao)轉(zhuan)染(ran)服務。
    當前的細胞(bao)轉染方法(fa)主要(yao)有(you)物(wu)理方法(fa)和化(hua)學(xue)方法(fa)兩種：這(zhe)些(xie)轉染(ran)方法(fa)包(bao)括電(dian)穿孔儀穿孔轉(zhuan)染(ran)法(fa)、磷酸(suan)鈣暴露(lu)法(fa)、基於(yu)脂(zhi)質體(ti)的轉染(ran)方法(fa)，這(zhe)些(xie)方法(fa)都(dou)是通(tong)過(guo)細(xi)胞(bao)膜遞送(song)遺(yi)傳(chuan)基(ji)因(yin)分(fen)子而不(bu)會對(dui)細(xi)胞(bao)造(zao)成任何損(sun)傷(shang)。

壹(yi)、化(hua)學轉染方法(fa)
化學(xue)轉(zhuan)染(ran)是壹種當下應(ying)用較(jiao)為普(pu)遍(bian)的(de)壹種方法(fa)，目前市(shi)場(chang)上(shang)提(ti)供(gong)的(de)轉(zhuan)染試(shi)劑類(lei)型(xing)繁多(duo)且成本(ben)低(di)廉(lian)且(qie)可(ke)以直接用於實(shi)驗(yan)。瞬時轉染(ran)是壹種常(chang)見的轉(zhuan)染(ran)類(lei)型(xing)，它通(tong)常(chang)用於短期的基因(yin)表達。比如基(ji)因(yin)表達研究、基因(yin)沈(chen)默研究和重(zhong)組(zu)蛋白分(fen)析等(deng)入(ru)研究分析(xi)的(de)應(ying)用。
不(bu)同細(xi)胞類(lei)型(xing)的化(hua)學(xue)轉(zhuan)染實驗(yan)步(bu)驟基(ji)本(ben)相(xiang)同(tong)。主(zhu)要(yao)過(guo)程(cheng)如(ru)下：在亞(ya)匯(hui)合處(chu)鋪(pu)板(ban)細(xi)胞（註意(yi)鋪(pu)板(ban)密(mi)度(du)和均(jun)勻度(du)）→在轉(zhuan)染前立即準(zhun)備轉(zhuan)染(ran)試(shi)劑/DNA復合物(wu)→評估(gu)構建體表達系統。需(xu)要(yao)註(zhu)意(yi)的(de)是：細胞培養(yang)基在鋪(pu)板(ban)後(hou)壹天更(geng)新(xin)，然後在(zai)轉染(ran)後(hou)幾(ji)小(xiao)時更(geng)新(xin)。必須(xu)對(dui)轉(zhuan)染(ran)方案(an)進(jin)行(xing)優(you)化，以確(que)保(bao)高(gao)轉(zhuan)染效(xiao)率，並且(qie)該方法(fa)對(dui)被(bei)轉(zhuan)染的細(xi)胞無(wu)毒(du)。
脂(zhi)質體(ti)轉染是使用脂(zhi)質體(ti)進行的(de)轉染(ran)，脂(zhi)質體(ti)是壹種可(ke)以與(yu)細(xi)胞(bao)膜(mo)融合並能(neng)夠(gou)釋(shi)放其內(nei)容物(wu)的小(xiao)分(fen)子。它通(tong)常(chang)帶有正(zheng)電荷(he)的(de)陽離子聚(ju)合物(wu)能有(you)效(xiao)地(di)與(yu)帶負電荷(he)的(de)核酸(suan)相(xiang)結合，是壹種簡便(bian)的轉染(ran)方法(fa)。也是細胞轉染(ran)技(ji)術中(zhong)的(de)主要(yao)構成部(bu)分。脂(zhi)質體(ti)轉染方法(fa)主要(yao)用於新(xin)藥的研(yan)發和(he)開(kai)發，特別(bie)是在腫瘤學中(zhong)，通(tong)過(guo)脂(zhi)質體(ti)、類(lei)脂(zhi)質體(ti)等(deng)基(ji)於(yu)小(xiao)分(fen)子的藥(yao)物(wu)靶向特定(ding)基因(yin)（例(li)如癌(ai)基因(yin)）或(huo)使用 RNAi 技(ji)術進(jin)行(xing)基因(yin)沈(chen)默。
二、物(wu)理轉(zhuan)染(ran)方法(fa)
     電穿孔和(he)細(xi)胞註射是物(wu)理轉(zhuan)染(ran)常(chang)用的方法(fa)，它們(men)能(neng)夠(gou)完成核酸(suan)的遞送(song)，但(dan)由(you)於(yu)物(wu)理轉(zhuan)染(ran)法(fa)容易(yi)在壹(yi)定程(cheng)度(du)上(shang)造(zao)成細(xi)胞(bao)膜的(de)破(po)壞(huai)，對(dui)於(yu)生(sheng)長條件較(jiao)為苛刻的(de)細(xi)胞甚(shen)至會造(zao)成細(xi)胞(bao)死亡(wang)。所(suo)以這(zhe)種方法(fa)多(duo)數適用於傳(chuan)統(tong)上(shang)難(nan)以轉(zhuan)染的(de)細(xi)胞。物(wu)理轉(zhuan)染(ran)主(zhu)要(yao)有電穿孔、顯(xian)微(wei)註射和(he)基(ji)因(yin)槍(qiang)粒(li)子遞送(song)等(deng)方法(fa)。
     電穿孔方法(fa)主要(yao)取(qu)決(jue)於 DNA 濃度(du)和使用的細(xi)胞(bao)類(lei)型(xing)。傳(chuan)統(tong)的(de)電穿孔儀需要使用電穿孔比(bi)色(se)皿。隨著(zhe)細胞生(sheng)物(wu)學的(de)不(bu)斷(duan)發(fa)展(zhan)，目前大(da)多(duo)數電穿孔儀已基(ji)本(ben)實現(xian)從(cong)原(yuan)代(dai)細胞和幹細胞到原(yuan)核細(xi)胞和(he)哺乳(ru)動(dong)物(wu)細胞(bao)的細(xi)胞類(lei)型(xing)兼容(rong)。
     顯(xian)微註射通(tong)常(chang)用於將 DNA 和(he) RNA 引(yin)入(ru)單(dan)個(ge)細胞，例如(ru)胚(pei)胎幹細胞。借助顯(xian)微(wei)操(cao)作器和(he)顯微(wei)鏡(jing)，將 DNA 或(huo) RNA 直接插入(ru)細胞(bao)質或(huo)細(xi)胞(bao)核中(zhong)。比如(ru)：幹細胞註射等(deng)，這(zhe)種方法(fa)的缺(que)陷在於(yu)會(hui)消(xiao)耗較(jiao)多(duo)的時間，但(dan)是會產生(sheng)較(jiao)高(gao)的(de)轉染效(xiao)率。
     采(cai)用Biolistic 粒(li)子遞送(song)的(de)方式(shi)將攜(xie)帶核酸(suan)的微粒(li)將 DNA 或(huo) RNA 引(yin)入(ru)細胞(bao)也是壹種較(jiao)為快(kuai)速的(de)物(wu)理轉(zhuan)染(ran)方法(fa)。這(zhe)種粒(li)子遞送(song)法(fa)的缺(que)陷在於(yu)細(xi)胞(bao)的(de)致死率(lv)較(jiao)高(gao)，所(suo)以適(shi)應(ying)範(fan)圍不(bu)是很(hen)廣(guang)。

      蘇(su)州阿(e)爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu) 不(bu)僅提(ti)供(gong)細(xi)胞(bao)生(sheng)物(wu)反(fan)應(ying)器(qi)、微生(sheng)物(wu)發酵罐(guan)等(deng)細(xi)胞(bao)規(gui)模(mo)化(hua)生(sheng)產設(she)備(bei)還(hai)可(ke)根(gen)據客(ke)戶要求(qiu)的(de)尺(chi)寸(cun)進(jin)行(xing)定(ding)制化操(cao)作，可(ke)用於 HEK293細(xi)胞(bao) 的(de)培(pei)養(yang),懸浮(fu)細(xi)胞培養(yang)、貼壁細(xi)胞(bao)培養(yang)、微載體(ti)培(pei)養(yang)、微生(sheng)物(wu)培養(yang)的生(sheng)物(wu)反(fan)應(ying)器(qi) ，實現(xian)了廠(chang)商直供(gong)，壹(yi)罐(guan)多(duo)用，滿(man)足(zu)不(bu)同的(de)用戶需(xu)求(qiu)。並提(ti)供(gong)細(xi)胞(bao)轉染試(shi)劑、生(sheng)物(wu)反(fan)應(ying)器(qi)安裝服(fu)務、技(ji)術支(zhi)持(chi)、操(cao)作指(zhi)導等(deng)。如(ru)需(xu)了解更(geng)多(duo)細胞(bao)轉染(ran)技(ji)術 、細(xi)胞(bao)轉染(ran)試(shi)劑相(xiang)關(guan)問題