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          TECHNICAL ARTICLES

          技(ji)術文(wen)章

          當(dang)前(qian)位置(zhi):首(shou)頁技(ji)術文(wen)章細胞培養(yang)生物反(fan)應器放(fang)大(da)效果不(bu)理(li)想,可(ke)能因(yin)為妳(ni)沒(mei)有(you)註意(yi)到這(zhe)幾(ji)點?

          細(xi)胞(bao)培養(yang)生物反(fan)應器放(fang)大(da)效果不(bu)理(li)想,可(ke)能因(yin)為妳(ni)沒(mei)有(you)註意(yi)到這(zhe)幾(ji)點?

          更(geng)新(xin)時間:2022-09-22點(dian)擊(ji)次數(shu):2338

          隨著(zhe)轉(zhuan)基因制藥(yao)技(ji)術的(de)不斷發(fa)展,細胞(bao)培養(yang)放(fang)大(da)的(de)規模(mo)化需(xu)求(qiu)也(ye)在(zai)逐漸增大(da),通(tong)常(chang)在(zai)實驗室(shi)進行的(de)小批(pi)量細胞傳(chuan)代(dai)實(shi)驗由(you)於投(tou)入(ru)成(cheng)本(ben)小,操(cao)作過(guo)程熟練(lian),基(ji)本(ben)不會(hui)存在(zai)太大(da)問(wen)題(ti),當(dang)進入(ru)生物反(fan)應器規模(mo)化培養(yang)階(jie)段(duan)時,投入(ru)的(de)成(cheng)本(ben)往(wang)往(wang)較大(da),需(xu)要(yao)考(kao)慮的(de)因素(su)也變多,稍不註(zhu)意就會(hui)影(ying)響到細胞的(de)產(chan)量或質(zhi)量。

          其(qi)實(shi)細胞的(de)培養(yang)放(fang)大(da)不(bu)論是(shi)處在(zai)哪個階段(duan)的(de)放(fang)大(da)都需要保(bao)持(chi)在(zai)同壹恒(heng)定(ding)的(de)環境(jing)下進(jin)行,這(zhe)樣才(cai)能培養(yang)出生長密度(du)、細(xi)胞存(cun)活率(lv)、以(yi)及培養(yang)產(chan)物等維持相(xiang)對穩(wen)定(ding)的(de)狀態(tai)。所以在(zai)進入(ru)生物反(fan)應器擴培階(jie)段(duan)時,需要(yao)註(zhu)意到以下幾點(dian):

          壹(yi)、攪(jiao)拌(ban)槳類(lei)型(xing)、攪(jiao)拌(ban)轉(zhuan)速及剪(jian)切力(li)

          通(tong)常使用的(de)攪(jiao)拌(ban)式生物反(fan)應器,可(ke)以使細(xi)胞(bao)與營(ying)養物質(zhi)充分混合(he)、懸(xuan)浮具(ju)有(you)較高(gao)的(de)通氣溶(rong)氧環境(jing),但是(shi)攪(jiao)拌(ban)槳類(lei)型(xing)以及(ji)過快(kuai)的(de)攪(jiao)拌(ban)轉(zhuan)速帶(dai)來(lai)了(le)較(jiao)高(gao)的(de)剪(jian)切力(li),由(you)於細(xi)胞不(bu)同於微生物,構(gou)成(cheng)細胞(bao)的(de)細胞(bao)質較為脆弱,對(dui)剪(jian)切力(li)比(bi)較敏感,通常(chang)情(qing)況(kuang)下,細胞培養(yang)適宜的(de)葉(ye)端(duan)速為 1-2m/s。所以選擇(ze)合(he)適的(de)攪(jiao)拌(ban)槳類(lei)型(xing)及合(he)適的(de)轉(zhuan)速控制也(ye)是(shi)很有(you)必要的(de)。搏旅(lv)的(de)Bio PRO系列(lie)微載體培養(yang)生物反(fan)應器在(zai)設計時采用提(ti)升(sheng)式攪(jiao)拌(ban)槳在(zai)保(bao)證(zheng)混合(he)效果的(de)同時也有(you)效降低了(le)細(xi)胞剪(jian)切力(li),對(dui)於DISKS載體來(lai)說(shuo),這(zhe)種(zhong)攪(jiao)拌(ban)槳的(de)設計幾乎(hu)不會(hui)因剪(jian)切力(li)和(he)通(tong)氣氣泡(pao)對細(xi)胞造(zao)成(cheng)任(ren)何(he)不良(liang)影(ying)響。

          攪(jiao)拌(ban)速率(lv)計算公式如下:

           

           

           

          葉(ye)端(duan)速計算公式如下

           

           

          二(er)、通(tong)氣量(liang)、溶(rong)氧度、PH/DO氧傳(chuan)遞速率(lv)的(de)參數(shu)控制 

          細(xi)胞放(fang)大(da)培養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong),溶(rong)氧度參數(shu)、CO2濃(nong)度(du)、以(yi)及(ji)通氣量(liang)的(de)大(da)小(xiao)等重(zhong)要參數(shu)都會(hui)直接(jie)影(ying)響到細胞的(de)生長狀態(tai),比(bi)如隨著(zhe)CO2濃(nong)度(du)的(de)增加,PH值(zhi)也(ye)會(hui)相(xiang)應增(zeng)大(da)從(cong)而(er)影(ying)響到培養(yang)環(huan)境(jing)的(de)改變(bian)不利於細(xi)胞生長;所以溶(rong)氧度及二(er)氧(yang)化(hua)碳(tan)濃(nong)度(du)的(de)控制需(xu)要及時準(zhun)確。搏旅(lv)生產(chan)的(de)Bio PRO系列(lie)微載體培養(yang)生物反(fan)應器系(xi)列(lie)采(cai)用了(le)熱(re)質流(liu)控制儀全(quan)面實現(xian)了氣體(ti)流量(liang)的(de)全自(zi)動(dong)控制;並且采(cai)用PID控制系(xi)統準(zhun)確控制溶(rong)氧度、CO2濃(nong)度(du)等,從(cong)而(er)及時平衡(heng)PH參數(shu),在(zai)通氣設計上深層(ceng)通(tong)氣采(cai)用軟(ruan)、硬(ying)件(jian)相(xiang)結合(he)的(de)控制方(fang)式有(you)效消(xiao)除(chu)了培養(yang)基(ji)的(de)逆流,並采用了(le)獨(du)立(li)的(de)滅菌系統,保(bao)證(zheng)滅菌的(de)*性。

          三、滅(mie)菌操(cao)作的(de)*性

          我(wo)們知(zhi)道(dao)在(zai)細胞生長過程中,微生物的(de)危(wei)害(hai)是(shi)致命性的(de),滅菌的(de)*性也(ye)成(cheng)為影(ying)響細胞(bao)存活率(lv)的(de)重(zhong)要因素(su)之(zhi)壹。在(zai)進行取樣檢驗,補充(chong)培養(yang)基(ji)等操(cao)作過(guo)程中很(hen)容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)細菌汙(wu)染。楚(chu)怡生物反(fan)應器設計了在(zai)位滅菌加樣/取(qu)樣閥(fa)組(zu),有(you)效避免了操(cao)作汙(wu)染,在(zai)進氣與(yu)尾氣過(guo)濾(lv)器、物料(liao)進口、管(guan)底(di)閥(fa)、管(guan)道等部(bu)件(jian)也都采用了(le)獨(du)立(li)控制的(de)滅菌系統,以達(da)到整(zheng)罐(guan)滅菌,360°滅菌的(de)效果,保(bao)證(zheng)了滅(mie)菌的(de)*性。 

          除(chu)了以(yi)上幾個方面,培養(yang)基(ji)的(de)選擇(ze)、培養(yang)方(fang)式的(de)選擇(ze)攪(jiao)拌(ban)槳類(lei)型(xing)、電極(ji)、溫度、混合(he)時間、細(xi)胞(bao)密度(du)、操(cao)作方(fang)便性、生物反(fan)應器材(cai)質、氣體(ti)壓力(li)調(tiao)節等相(xiang)關(guan)參數(shu)。由(you)此可(ke)見,熟(shu)練(lian)掌(zhang)握細(xi)胞(bao)生產(chan)擴培過(guo)程(cheng)中(zhong)的(de)各項(xiang)參數(shu)並做好(hao)記錄(lu)及數(shu)據分析(xi)是(shi)細胞(bao)規模(mo)擴培工(gong)藝的(de)核心也是(shi)細胞(bao)的(de)放(fang)大(da)培養(yang)成(cheng)功(gong)的(de)關(guan)鍵(jian)步(bu)驟。

           

                蘇(su)州(zhou)阿(e)爾(er)法(fa)生物所提(ti)供的(de)楚(chu)怡生物反(fan)應器常(chang)用於(yu)MDCK細(xi)胞(bao)、HEK293細胞培養(yang),懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞培養(yang)、貼(tie)壁細(xi)胞(bao)培養(yang)、微載體培養(yang)、微生物培養(yang)、生物制藥(yao)等領(ling)域(yu),不(bu)僅有(you)適合實(shi)驗使用的(de)中小(xiao)型(xing)生物反(fan)應器,還可(ke)以根(gen)據不同(tong)用戶需求(qiu)定(ding)制大(da)型(xing)尺寸(cun)的(de)生產(chan)型(xing)發(fa)酵罐(guan)、生物反(fan)應器。實(shi)現(xian)了廠(chang)商(shang)直(zhi)供,壹(yi)罐(guan)多用,同(tong)時我們(men)還提(ti)供免(mian)費(fei)的(de)安裝(zhuang)服務、免費(fei)技(ji)術支持、免(mian)費操(cao)作指導(dao)等服務。


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