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什麽是HEK293 細胞,293細胞的應用有哪些(xie)方面(mian)?
更(geng)新時(shi)間(jian):2022-08-18
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如(ru)果(guo)您*熟悉(xi)細胞培(pei)養,您可(ke)能聽(ting)說過 HEK293 細胞。HEK293 細胞新藥實驗室 較(jiao)為常(chang)用(yong)的細胞系(xi)之(zhi)壹(yi)。但(dan)它們(men)是什麽?為什麽要使用(yong)它(ta)們(men)?“293" 是什麽意(yi)思(si)?與HEK293T 細胞相(xiang)同嗎(ma)?請(qing)繼(ji)續(xu)閱(yue)讀(du)這(zhe)些(xie)問(wen)題(ti)的答(da)案(an)以及更(geng)多內(nei)容(rong)。
壹(yi)、什麽是 HEK293 細胞?
HEK293 細胞是人(ren)類(lei)胚胎腎細胞,起(qi)初由(you)荷(he)蘭(lan)生物(wu)學(xue)家(jia) Alex Van der Eb 在(zai) 1970 年(nian)代(dai)初(chu)期分離和培(pei)養。Van der Eb 實驗室的博士(shi)後(hou) Frank Graham 用剪切的腺(xian)病(bing)毒 5 (Ad5) DNA 進行(xing)轉(zhuan)染 。這(zhe)是他(ta)們(men)的第 293 次實驗,所以就(jiu)命名(ming)該細胞系(xi)為 HEK293 ,蓋(gai)細胞系(xi)的主(zhu)要作用是通(tong)過細胞的基(ji)因改(gai)造(zao)實(shi)現(xian)重(zhong)組蛋白合成(cheng)。那(na)麽,HEK293T 細胞與HEK293是同壹(yi)種細胞嗎(ma)?
其實,並(bing)不(bu)*是,因為系(xi)HEK293T細胞的來(lai)源是將 SV40 大 T 抗(kang)原(yuan)整(zheng)合(he)到(dao) HEK293 基因(yin)組中(zhong)——這(zhe)意(yi)味(wei)著它們(men)能(neng)夠從攜(xie)帶 SV40 復(fu)制起點(dian)的質(zhi)粒(li)載(zai)體中(zhong)產(chan)生大量(liang)蛋白質。 
二、HEK 細胞有何(he)優(you)點(dian)?
使(shi)用 HEK293 細胞有很(hen)多優(you)點(dian)。它(ta)們(men)是壹(yi)種耐寒、半(ban)貼壁、低維護(hu)的細胞系(xi),分裂(lie)迅(xun)速,大約每(mei) 36 小時(shi)可(ke)以增(zeng)長(chang) 1倍(bei)。培(pei)養的細胞既(ji)能用(yong)於(yu)瞬(shun)時(shi)和穩(wen)定表(biao)達,也可懸(xuan)浮(fu)培(pei)養或(huo)作為單(dan)層培(pei)養,比較(jiao)容(rong)易(yi)轉染,並(bing)且(qie)能(neng)夠產(chan)生大量(liang)的 重(zhong)組蛋白。
目(mu)前,HEK293 細胞主(zhu)要用於(yu)癌癥研究、新藥開發(fa)、抗(kang)體蛋白生產(chan)、信(xin)號(hao)轉導(dao)和(he)蛋白質相互(hu)作用研(yan)究(jiu)等(deng)領域(yu)。
三、 HEK293 細胞的分(fen)類(lei)
HEK293 細胞已被(bei)用(yong)於(yu)創建(jian)具有特(te)定用(yong)途的各(ge)種衍生細胞系(xi)。
表 1:HEK293 細胞的壹(yi)些常(chang)用(yong)衍生物(wu)。
衍(yan)生物(wu) | 特(te)征 |
293-F | 快(kuai)速成(cheng)長(chang);懸(xuan)浮(fu)生長(chang);在(zai)無(wu)血(xue)清培(pei)養基中(zhong)生長(chang) |
293-H | 快(kuai)速成(cheng)長(chang);懸(xuan)浮(fu)生長(chang);在(zai)無(wu)血(xue)清培(pei)養基中(zhong)生長(chang);在(zai)斑(ban)塊檢測(ce)中具有良好(hao)的依(yi)從性 |
293T | 高(gao)轉染性(xing);包含(han) SV40 T 抗(kang)原(yuan) |
293 | 293-F 細胞系(xi)的衍(yan)生物(wu);快(kuai)速增(zeng)長(chang);包含(han) SV40 T 抗(kang)原(yuan) |
293E或(huo)239-EBNA1 | 表達 EBNA-1 蛋白 |
四(si)、HEK293的生長(chang)條(tiao)件(jian)
HEK293 細胞生長(chang)對(dui)培(pei)養環境要求不(bu)高。壹(yi)般情(qing)況(kuang)下(xia)維持(chi) 37°C 和 5% CO 2的加(jia)濕(shi)培(pei)養箱及充足的培(pei)養基供應即可(ke)滿(man)足 ,為防(fang)止(zhi)細菌(jun)感染,必(bi)要時可(ke)添加(jia)少許(xu)抗生素(su),比如(ru):青(qing)黴(mei)素-鏈黴(mei)素-谷(gu)氨酰(xian)胺(an)等(deng)。細胞轉(zhuan)染方(fang)式可以建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)HEK293 轉(zhuan)染試劑盒,操作方便(bian)、簡(jian)單。
五(wu)、HEK293 細胞培(pei)養註意(yi)事(shi)項(xiang)
1.HEK293在(zai)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養時,長(chang)期培(pei)養會導(dao)致細胞活(huo)力下(xia)降,所以培(pei)養代(dai)數(shu)不(bu)宜(yi)過多(duo),通(tong)常培(pei)養的代(dai)數(shu)維(wei)持(chi)在(zai)13代(dai)以下(xia),如(ru)果(guo)選(xuan)擇的細胞系(xi)超(chao)過(guo)20代(dai),需(xu)要需要解凍(dong)新的細胞重(zhong)新開(kai)始(shi)。
2.實(shi)驗操作過程(cheng)中需(xu)要註意(yi)無(wu)菌(jun)操作,避免(mian)支(zhi)原(yuan)體感染,同時(shi)做(zuo)好(hao)定時(shi)檢(jian)測(ce)。
3.由(you)於(yu)HEK293 細胞系(xi)的衍(yan)生物(wu)較(jiao)多(duo),所以培(pei)養時需(xu)要根(gen)據實(shi)驗選(xuan)擇合(he)適的細胞系(xi)進行(xing)培(pei)養。
蘇(su)州阿爾法生物(wu)實(shi)驗器材(cai)有限公(gong)司(si)13年(nian)專(zhuan)註於(yu)生物(wu)實(shi)驗室儀(yi)器設(she)備與耗(hao)材的供應,儀(yi)器設(she)備涵(han)蓋(gai)生物(wu)反(fan)應器、發(fa)酵(jiao)罐(guan)、細胞搖(yao)床(chuang)、PCR儀(yi)、移液器、離(li)心(xin)機等(deng)上百種品(pin)類(lei)試劑耗(hao)材包括(kuo):培(pei)養瓶、搖(yao)瓶(ping)、培(pei)養基、 HEK293細胞 、細胞培(pei)養試劑、細胞轉(zhuan)染試劑盒等(deng)細胞培(pei)養相關(guan)。如(ru)有更多問(wen)題(ti)可進(jin)入網(wang)站(zhan)進(jin)行咨詢(xun)。
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