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瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳實驗中常(chang)用(yong)的(de)核酸(suan)染(ran)料及毒(du)性(xing)介紹
更(geng)新(xin)時間:2022-06-23
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在分(fen)子(zi)生(sheng)物學中,電(dian)泳實驗是核酸(suan)的(de)分(fen)離(li)、純(chun)化(hua)及蛋白識(shi)別(bie)的有(you)效方(fang)法(fa),可(ke)以與(yu)凝(ning)膠(jiao)成像(xiang)系統(tong)配(pei)合使用(yong),也可(ke)以單(dan)獨使用(yong),具(ju)體(ti)根據實驗目(mu)的(de)來(lai)選(xuan)擇。瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳是通過(guo)DNA片段(duan)在(zai)瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)介質(zhi)電(dian)場中的電(dian)泳速(su)率大小來(lai)判(pan)斷(duan) DNA分(fen)子(zi)量(liang)的大小的實驗方(fang)法(fa)。

瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)中常(chang)用(yong)的(de)染(ran)料有哪些?
1.溴(xiu)化(hua)乙錠 :溴 化(hua)乙錠通常(chang)習(xi)慣簡(jian)稱(cheng)“EB",是核酸(suan)染(ran)色及凝(ning)膠(jiao)成像(xiang)分(fen)析(xi)中普遍使用(yong)的(de)染(ran)料。
EB染(ran)料屬(shu)於核酸(suan)分(fen)子(zi)嵌(qian)入型染(ran)色劑,且具(ju)有DNA誘(you)導(dao)突(tu)變(bian)的(de)作(zuo)用(yong)。研(yan)究發(fa)現(xian),長期(qi)使用(yong)溴(xiu)化(hua)乙錠或長期(qi)處在含(han)溴化(hua)乙錠的實驗環境(jing)中,會(hui)對人體(ti)造成較(jiao)大的(de)傷(shang)害,甚(shen)至(zhi)增加(jia)遺傳方(fang)面的(de)致(zhi)畸(ji)率 。所(suo)以在(zai)實驗室(shi)中,使用(yong)EB類染(ran)料時要做好全套(tao)防(fang)護,實驗後(hou)的廢(fei)液、耗材(cai)等(deng)也要嚴(yan)格管(guan)理,切(qie)勿(wu)隨意丟棄(qi),以防(fang)對他(ta)人(ren)造成間接(jie)傷(shang)害。
2.吖(a)啶(ding)橙染(ran)料:吖啶(ding)橙染(ran)料(Goldview)主(zhu)要用(yong)於(yu)RNA 染(ran)色、熒(ying)光染(ran)色以及細(xi)胞(bao)雕亡(wang)實驗等(deng),從理論上講(jiang)雖(sui)然(ran)Goldview染(ran)料的毒(du)性遠(yuan)遠低(di)於 EB,但(dan)是在實驗室(shi)也不(bu)可(ke)粗心(xin)大意(yi)。
3.GelGreen熒(ying)光染(ran)料與 Gelred核酸(suan)染(ran)料
GelRed 和(he)GelGreen 都(dou)屬(shu)於熒(ying)光核酸(suan)染(ran)料,其(qi)中Biotium的*較(jiao)大,在(zai)化(hua)學發(fa)光、凝(ning)膠(jiao)成像(xiang)、電(dian)泳等(deng)相關(guan)實驗中應用(yong)較(jiao)為普遍(bian)。 由(you)於(yu)Gelred和(he)GelGreen的分(fen)子(zi)量(liang)較(jiao)大,且(qie)具(ju)有特殊(shu)的(de)油(you)性(xing)分(fen)子(zi),很(hen)難滲透(tou)細(xi)胞(bao)膜(mo)進(jin)入(ru)動物細胞(bao)內,所以這(zhe)種染(ran)料相對較(jiao)為安全,實驗後(hou)的廢(fei)棄(qi)物對周邊(bian)環境(jing)的危害性(xing)也較(jiao)小,可(ke)放心(xin)使用(yong)。
4.SYBR Green染(ran)料 和(he)SYBR Gold染(ran)料
SYBR Green與SYBR Gold具(ju)有靈(ling)敏(min)度(du)好,成本(ben)低(di)廉(lian),毒(du)性(xing)低(di),信(xin)噪比較(jiao)高,並且實驗時無需(xu)進(jin)行洗脫操作(zuo)等(deng)特點,廣(guang)泛(fan)應用(yong)於(yu)凝膠(jiao)電(dian)泳分(fen)析(xi)實驗中。但是作為花(hua)箐素(su)類核酸(suan)染(ran)料其(qi)穩定性(xing)較(jiao)差(cha),在(zai)壹定(ding)光誘(you)導(dao)下(xia)也會(hui)產生(sheng)強(qiang)誘(you)變(bian)力(li),易造成DNA序(xu)列(lie)上(shang)的(de)基(ji)因位(wei)點突(tu)變(bian)。
常(chang)用(yong)的(de)這幾(ji)種核酸(suan)染(ran)料相信(xin)每個(ge)實驗室(shi)都(dou)使用(yong)過(guo),但是對於核酸(suan)染(ran)料的危害也要註(zhu)意(yi),實驗中做好實驗防(fang)護也很(hen)關(guan)鍵。
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