細胞破碎的方法有(you)哪(na)些？

標簽：細菌細胞壁  細胞破碎 細胞裂(lie)解
  細胞學實驗(yan)中(zhong)，尤其(qi)是植(zhi)物(wu)細胞實驗(yan)，常(chang)常(chang)會遇(yu)到的細胞裂(lie)解的相(xiang)關(guan)實(shi)驗(yan)，目的是通過(guo)機(ji)械(xie)貨(huo)非(fei)機(ji)械(xie)的方法打(da)破細胞壁的束縛(fu)，從而(er)在(zai)進行細胞質或細胞核內部(bu)完(wan)成DNA編輯(ji)相(xiang)關(guan)操作的壹種(zhong)實(shi)驗(yan)方法。細胞破碎的方法有(you)哪(na)些?總(zong)結(jie)方(fang)法主(zhu)要有以(yi)下(xia)8種(zhong)：
壹(yi)、細胞破碎的機(ji)械(xie)方法
機(ji)械(xie)細胞破壞實際上(shang)就是這樣(yang)：通過(guo)固體(ti)或(huo)液(ye)體(ti)剪(jian)切的方式強行打開(kai)細胞壁並溢出內容物。機(ji)械(xie)破碎的優(you)點(dian)是不會引入(ru)可(ke)能(neng)幹(gan)擾(rao)您(nin)想要提取的物質(zhi)的化學物質。然(ran)而，容易(yi)造(zao)成大(da)分(fen)子內容物失活。
1.研(yan)缽和(he)研杵(chu)
研磨(mo)破壁法通常(chang)是將植(zhi)物(wu)組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben)放(fang)在置(zhi)於冷(leng)凍液(ye)氮中(zhong)，通過(guo)組(zu)織(zhi)研(yan)磨(mo)器(qi)的研磨(mo)來(lai)完(wan)成的。當組(zu)織(zhi)材料被(bei)破壞時，可以(yi)通過(guo)添加溶(rong)劑(ji)來(lai)提(ti)取代謝物。
2.珠磨(mo)法
珠(zhu)磨(mo)法是指(zhi)在(zai)等量(liang)的細胞懸液(ye)和(he)渦旋(xuan)混(hun)合(he)器(qi)中(zhong)加入(ru)玻(bo)璃珠(zhu)或(huo)磁珠(zhu)用(yong)於通過(guo)固體(ti)剪(jian)切(qie)的作用來(lai)使(shi)細胞裂(lie)解的方法。這(zhe)種(zhong)細胞裂(lie)解法的機(ji)械(xie)剪切力(li)足(zu)夠(gou)溫(wen)和(he)，可以(yi)保持(chi)細胞器(qi)的完整(zheng)性，具(ju)有(you)較高(gao)的細胞破碎率可(ke)大(da)規模(mo)使(shi)用，適(shi) 用(yong)於(yu)各(ge)種(zhong)細胞破碎。缺點(dian)是：大(da)分(fen)子內容物較易(yi)失(shi)活(huo)，並且漿液(ye)分(fen)離較為困(kun)難。
3.超(chao)聲(sheng)波破碎儀(yi)
超聲(sheng)波均質器(qi)的工(gong)作原理是在浸入細胞溶液(ye)中(zhong)的鈦探(tan)針(zhen)中(zhong)引起振動。發(fa)生稱為(wei)空(kong)化的過程(cheng)，其(qi)中(zhong)微小(xiao)氣泡(pao)形成(cheng)並爆炸(zha)，產(chan)生局(ju)部沖(chong)擊(ji)波並(bing)通過(guo)壓力(li)變(bian)化破壞細胞壁。這種(zhong)方(fang)法非(fei)常(chang)適(shi)用(yong)於(yu)植(zhi)物(wu)和(he)真菌細胞，但(dan)有(you)壹(yi)個(ge)缺點(dian)：噪音較大(da)，所以(yi)使(shi)用時，必須在額(e)外的房(fang)間內進(jin)行(xing)。
4.均質機(ji)破碎法
均質器(qi)在(zai)細胞上(shang)使用(yong)類似於珠(zhu)法的剪切(qie)力。可(ke)以(yi)通過(guo)將細胞擠(ji)壓(ya)到比它們略(lve)小的管子中(zhong)來(lai)進(jin)行均質化，從而(er)剪(jian)掉(diao)外層(ceng)（法壓(ya)）或(huo)使(shi)用(yong)攪(jiao)拌(ban)機(ji)中(zhong)的旋(xuan)轉(zhuan)刀(dao)片(pian)（轉子-定(ding)子處(chu)理器(qi)）。
5.冷(leng)凍破碎法
凍(dong)融(rong)循環通過(guo)在解凍時形成(cheng)冰晶和(he)細胞膨脹(zhang)來(lai)起作用，最終導(dao)致破裂(lie)。用於(yu)藻(zao)類和(he)軟(ruan)植(zhi)物(wu)材料。缺(que)點(dian)是非常(chang)耗時。
6.高(gao)溫(wen)（微波、高(gao)壓(ya)釜）破碎法
高(gao)溫(wen)（和(he)壓力(li)）會破壞細胞壁內的鍵，也(ye)會使(shi)蛋(dan)白質(zhi)變(bian)性。盡(jin)管速度(du)很(hen)快，但(dan)如(ru)果您(nin)的應用(yong)受(shou)到熱對電池其(qi)余(yu)部分的損害(hai)影響，您最好(hao)找到另壹種(zhong)方(fang)法。

二(er)、 非(fei)機(ji)械(xie)細胞破碎的方法有(you)哪(na)些?
     非機(ji)械(xie)方法會(hui)涉及(ji)到添加分(fen)解細胞壁成分(fen)相(xiang)關(guan)的酶或(huo)化學品。它們通常(chang)與機(ji)械(xie)力結(jie)合(he)使用，以(yi)確保*破壞細胞。使用它們的缺點(dian)是細胞裂(lie)解後較難將(jiang)細胞從這(zhe)些物質(zhi)中(zhong)分離出來(lai)。
1.酵(jiao)素
    天(tian)然(ran)存(cun)在的酶可(ke)用於(yu)去(qu)除細胞壁，例(li)如(ru)在分(fen)離原生質體(ti)（無壁細胞）時。根據您(nin)使(shi)用的生物(wu)組(zu)織(zhi)樣(yang)本(ben)，可以(yi)使(shi)用 纖(xian)維(wei)素酶、幾丁(ding)質(zhi)酶、溶菌酶（破壞肽(tai)聚(ju)糖）、甘(gan)露(lu)糖酶、聚(ju)糖酶（等(deng)）等溶(rong)菌酶。
2.化學品
    醇(chun)、醚或氯(lv)仿(fang)等(deng)有機(ji)溶(rong)劑(ji)可(ke)以(yi)通過(guo)滲透(tou)細胞壁和(he)細胞膜來(lai)破壞細胞壁。如(ru)果您(nin)想(xiang)提(ti)取疏水性分子（如(ru)植(zhi)物(wu)色(se)素），它們會較為方(fang)便，因為(wei)它們會被(bei)收集在(zai)溶劑(ji)中(zhong)。通常(chang)用於(yu)植(zhi)物(wu)成(cheng)分(fen)的萃(cui)取。EDTA主要用於破壞革(ge)蘭氏(shi)陰(yin)性細菌的細胞壁，因為(wei) 其(qi)細胞壁含(han)有(you)脂多(duo)糖，這些脂多(duo)糖由 Mg 2+和(he) Ca 2+等陽(yang)離子穩(wen)定(ding)。EDTA 會螯(ao)合陽(yang)離子，從而(er)在(zai)細胞壁上(shang)留(liu)下孔(kong)洞(dong)，使(shi)外來(lai)基因輕松穿(chuan)透(tou)細胞壁到達(da)細胞內部(bu)。

   蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法生(sheng)物(wu)實(shi)驗(yan)器(qi)材有(you)限公(gong)司(si)13年專(zhuan)註(zhu)於(yu)生物(wu)實驗(yan)室儀(yi)器(qi)設(she)備(bei)及(ji)實驗(yan)室試(shi)劑(ji)耗材的供應。供應產(chan)品包(bao)括細胞裂(lie)解液(ye)、DNA提(ti)取試劑(ji)盒(he)、膠(jiao)回(hui)收試劑(ji)盒(he)等(deng)各(ge)種(zhong)天(tian)根試劑(ji)盒(he)，實(shi)驗(yan)室儀(yi)器(qi)設(she)備(bei)包(bao)括均質機(ji)、組(zu)織(zhi)研(yan)磨(mo)器(qi)、超(chao)聲波破碎儀(yi)、生物(wu)反(fan)應器(qi)、發(fa)酵罐、搖床、移液(ye)器(qi)、顯微鏡、純水設(she)備(bei)、冰箱(xiang)等。